充質(zhì)干細(xì)胞是干細(xì)胞的一個研究分支,干細(xì)胞是一種具有自我復(fù)制和多向分化能力的細(xì)胞。它們可以不斷自我更新,在特定條件下轉(zhuǎn)化為一個或多個構(gòu)成人體組織或器官的細(xì)胞。干細(xì)胞是人體的起源細(xì)胞,是構(gòu)成人體各種組織器官的祖細(xì)胞。
充質(zhì)干細(xì)胞是一種存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等)中的成體干細(xì)胞,具有多向分化潛能,是非造血干細(xì)胞。這種干細(xì)胞可以分化成多種間充質(zhì)細(xì)胞(如成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等)或非間充質(zhì)細(xì)胞,具有分化潛能,具有*的細(xì)胞因子分泌功能。細(xì)胞模型已應(yīng)用于增殖、移植和分化的研究,以及體外免疫反應(yīng)的鑒定。
1、對于塑料的粘附,細(xì)胞具有壁粘附性。
2、特異性表面抗原表達(dá)——陽性和陰性標(biāo)記。
3、多能分化,可在體外分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。
充質(zhì)干細(xì)胞實驗步驟:
1、從-196℃液氮罐中取出一根間充質(zhì)干細(xì)胞凍存管。
2、立即將凍存管放入37℃水浴中勻速擺動約一分鐘,直至管內(nèi)只剩下最后一塊晶體(注意:不要讓水通過產(chǎn)品管)。
3、用酒精擦拭噴嘴。
4、離心管中加入20ml*培養(yǎng)基,將融化的細(xì)胞懸液加入*培養(yǎng)基中,混勻。
5、取20ul充分混合的細(xì)胞懸液,用細(xì)胞計數(shù)器計數(shù)。
6、細(xì)胞懸液1400rpm,室溫離心5分鐘,去除上清。
7、加入10-20ml*培養(yǎng)基,輕輕混勻細(xì)胞。
8、向每個T225細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入50ml*培養(yǎng)基。
9、按10000-15000個細(xì)胞/cm2接種細(xì)胞,水平搖動使細(xì)胞分布均勻,顯微鏡下觀察細(xì)胞分布,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。